Er mwyn atal croeshalogi yn ystod y llawdriniaeth, y prif ofynion ar gyfer ei ddylunio, ei adeiladu a'i reoli gweithredu yw:
1. Rhaid i ddylunio ac adeiladu labordy, system weithio ddiogel neu weithdrefnau gweithredu safon diogelwch fodloni gofynion y dyfynbris&cyfredol; Gofynion Cyffredinol ar gyfer dyfynbris&Bioddiogelwch Labordy; GB19489.
2. Rhennir PCR yn bedwar maes swyddogaethol yn ôl y camau gweithio, sef ardal storio a pharatoi adweithyddion, ardal paratoi sbesimenau, ardal ymhelaethu, ac ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu. Os oes offeryn PCR fflwroleuol amser real wedi'i gyfarparu, gellir cyfuno'r meysydd ymhelaethu a dadansoddi cynnyrch. Rhaid marcio pob maes swyddogaethol yn glir, a rhaid peidio â chymysgu offer ac erthyglau mewn gwahanol feysydd swyddogaethol.
Gellir cynnal cyfeiriad llif aer y labordy PCR yn unol â'r ardal storio a pharatoi ymweithredydd → ardal paratoi sbesimenau → ardal ymhelaethu → ardal dadansoddi cynnyrch wedi'i chwyddo i atal y cynhyrchion chwyddedig rhag mynd i mewn i'r ardal wedi'i chwyddo ymlaen llaw ynghyd â llif aer. Gellir ei wneud yn y modd o ostwng pwysedd aer o ardal storio a pharatoi ymweithredydd → ardal paratoi sbesimenau → ardal ymhelaethu → ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu. Gellir ei gyflawni trwy osod ffaniau gwacáu, dyfeisiau gwacáu pwysau negyddol neu ddulliau dichonadwy eraill.
3. Dylai mynd i mewn i bob ardal waith ddilyn un cyfeiriad yn llym, hynny yw, ardal storio a pharatoi ymweithredydd → ardal paratoi sbesimenau → ardal ymhelaethu → ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu. Dylid defnyddio gwahanol feysydd gwaith (fel gwahanol liwiau). Ni chaiff gweithwyr fynd â dillad gwaith allan pan fyddant yn gadael pob ardal waith.
4. Dylid glanhau'r labordy i gyfeiriad ardal storio a pharatoi ymweithredydd → man paratoi sbesimenau → ardal ymhelaethu → ardal dadansoddi cynnyrch wedi'i chwyddo. Dylai fod gan wahanol ardaloedd arbrofol eu teclynnau glanhau eu hunain i atal croeshalogi.
5. Ar ôl i'r gwaith ddod i ben, rhaid glanhau'r ardal waith ar unwaith. Dylai wyneb mainc y labordy yn yr ardal waith allu gwrthsefyll effeithiau diheintio a glanhau cemegolion fel hypoclorit sodiwm. Dylai'r arbelydru uwchfioled ar wyneb mainc y labordy fod yn gyfleus ac yn effeithiol. Gan fod pellter ac egni'r arbelydru uwchfioled yn hanfodol iawn i'r effaith dadheintio, gellir defnyddio lamp uwchfioled symudol (tonfedd 254nm), ac ar ôl i'r gwaith gael ei gwblhau, gellir ei addasu i arbelydru o fewn 60-90cm ar y bwrdd arbrofol. . Gan mai dim ond ychydig gannoedd neu ddegau o barau sylfaen (bp) yw'r cynnyrch chwyddedig, nid yw'n sensitif i ddifrod UV, felly mae'n rhaid arbelydru'r darn chwyddedig wedi'i arbelydru UV am amser hirach, dros nos os yn bosibl.
Swyddogaethau'r ardal storio a pharatoi adweithydd yw: paratoi adweithyddion storio, dosbarthu adweithyddion a pharatoi'r gymysgedd adweithio ymhelaethu, yn ogystal â storio a pharatoi nwyddau traul fel tiwbiau centrifuge a thomenni. Dylai deunyddiau fel adweithyddion storio a nwyddau traul a ddefnyddir i baratoi sbesimenau gael eu cludo'n uniongyrchol i'r man storio a pharatoi ymweithredydd, ac ni allant fynd trwy'r ardal canfod ymhelaethiad. Ni ddylid storio'r deunyddiau rheoli cadarnhaol na'r deunyddiau rheoli ansawdd yn y pecyn yn yr ardal hon, ond dylid eu storio yn yr ardal hon. Ardal brosesu sbesimenau.
Swyddogaeth yr ardal paratoi sbesimenau yw: echdynnu, storio ac ychwanegu asid niwclëig (RNA, DNA) at y tiwb adweithio ymhelaethu. Ar gyfer llawdriniaethau sy'n cynnwys samplau clinigol, dylid cwrdd â'r gofynion ar gyfer offer amddiffynnol, amddiffyniad personol a manylebau gweithredu ar gyfer labordai eilaidd bioddiogelwch. Gan y gall halogiad gan erosolau ddigwydd wrth gymysgu sampl a phuro asid niwclëig, gellir sefydlu amodau gwasgedd positif yn yr ardal hon er mwyn osgoi halogiad aerosol o ardaloedd cyfagos. Er mwyn osgoi croeshalogi rhwng samplau, ar ôl ychwanegu'r asid niwclëig i'w brofi, rhaid gorchuddio'r tiwb adweithio sy'n cynnwys y gymysgedd adweithio. Ar gyfer deunyddiau a allai fod yn heintus, rhaid agor y caead yn y cabinet diogelwch biolegol, a rhaid cael gweithdrefnau clir ar gyfer trin sampl ac anactifadu.
Swyddogaeth y parth ymhelaethu yw: synthesis DNA, ymhelaethu a chanfod DNA. Er mwyn osgoi llygredd a achosir gan erosolau, dylid lleihau cerdded yn yr ardal i'r eithaf. Rhaid nodi na ddylid agor yr holl diwbiau adweithio a brofwyd yn yr ardal hon.
Swyddogaeth yr ardal dadansoddi cynnyrch wedi'i chwyddo yw: dadansoddi a phenderfynu ymhellach ar ddarnau chwyddedig, megis hybridization, electrofforesis treuliad ensymau, dadnatureiddio dadansoddiad hylif perfformiad uchel, dilyniannu, ac ati. Mae gan gynhyrchion ymhelaethu asid niwclëig amrywiol ddulliau dadansoddi, megis dulliau hybridization chwiliedydd. ar bilenni neu ar ficroplates neu sglodion (labelu radioniwclid neu labelu niwclid nad yw'n ymbelydrol), electrofforesis gel agarose uniongyrchol neu dreuliedig, electrofforesis gel polyacrylamid, trosglwyddiad deheuol, dulliau dilyniannu asid niwclëig, sbectrometreg màs, ac ati.
Yr ardal dadansoddi cynnyrch ymhelaethu yw prif ffynhonnell halogiad cynnyrch ymhelaethu yn y labordy PCR, felly dylid cymryd gofal i osgoi cario'r cynnyrch ymhelaethu allan trwy'r erthyglau a'r dillad gwaith yn yr ardal hon. Wrth ddefnyddio'r dull PCR-ELISA i ganfod cynhyrchion wedi'u mwyhau, rhaid defnyddio golchwr plât i olchi'r platiau, a rhaid casglu'r hylif gwastraff mewn 1 mol / L HCl, ac ni ellir ei dywallt yn y labordy, ond dylid ei daflu i ffwrdd. o'r labordy PCR. Gollwng. Rhaid socian y domen a ddefnyddir hefyd mewn 1 mol / L HCl ac yna ei rhoi mewn bag sothach i'w waredu yn unol â'r gweithdrefnau, fel llosgi. Gan y gall yr ardal hon ddefnyddio treigladau genetig a sylweddau gwenwynig fel bromid ethidium, acrylamid, fformaldehyd neu radioniwclidau, ac ati, dylid rhoi sylw i ddiogelwch diogelwch arbrofwyr.